Okužba s herpesom je lahko podlaga za neplodnost, ker virusi škodljivo vplivajo na reproduktivno zdravje žensk in moških. Toda tudi ob nastopu nosečnosti virusi herpesa povzročajo resno tveganje za intrauterino okužbo ploda in neželen izid nosečnosti [1, 4, 5, 7]. Herpes simplex virus (HSV) je pogosto vzrok za nevrološke, somatske in endokrine težave pri novorojenčkih in starejših otrocih [3]. Genitalna lokalizacija herpesa je še posebej nevarna, kar se pojavi pri nosečnicah v 7-35% primerov [2, 6].
Namen tega dela je bil preučiti optimizacijo diagnoze herpesne infekcije pri nosečnicah z obremenjeno porodniško in ginekološko anamnezo (AHA) v dinamiki nosečnosti..
Pregledanih je bilo 74 nosečnic: 49 primiparičnih in 25 večkratnih. Starost bolnikov je od 20 do 41 let. Vse ženske so imele OAGA in so jih poslali v MONIIAH z diagnozo "kronična virusna okužba herpesa"; Študija je bila izvedena v dinamiki od 16 do 24 tednov. nosečnosti.
Za identifikacijo markerjev HSV so bili uporabljeni virološki (metoda hitre kulture - BCM), molekularno biološki (PCR, PCR v realnem času) in serološke (ELISA) metode. Krvne, urinske in urogenitalne ostanke so proučevali kot klinično gradivo pri nosečnicah. O virusni obremenitvi v različnih kliničnih materialih smo presojali po količini HSV DNA, ki smo jo določili s PCR-rt. Za vsak vzorec smo zabeležili vrednost Ct praga (cikel praga je točka, pri kateri fluorescenca presega vrednost ozadja) in izračunali smo mediane. Dobljene vrednosti pragovnega cikla (Ct) smo primerjali z vrednostmi standardnih kontrolnih vzorcev z znano vsebnostjo DNA v vzorcu. Za oceno parametrov humoralnega odziva smo testirali serumsko TIFA na prisotnost specifičnih protiteles proti HSV (AT) razredov IgM in IgG. Določili smo tudi aktivnost protiteles, ki je bila izražena v titrih, in avidnost IgG-AT, ki je bila ocenjena po indeksu avidnosti (AI)..
Med anketiranimi nosečnicami je bila visoka stopnja okužbe: 43 (58%) od 74 žensk je imelo eno ali drugo urogenitalno okužbo (IGO) virusne in / ali bakterijske etiologije. Metoda diagnoze IGO - PCR s kvalitativno oceno rezultata. Podroben pregled zgodovine je pokazal, da je bila pri 21 (28%) nosečnicah ugotovljena mešana IGO. Struktura okužbe je zajemala celo vrsto patogenov UGO: Ureaplasma urealiticum, Micoplasma hominis, Toxoplasma gondii, Gardnerella vaginalis, Chlamidia trahomatis, Candida albicans, Human papillomavirus. Pri 22 (30%) nosečnicah je bila ugotovljena edina povzročiteljica IGO: Ureaplasma urealiticum - v 15 (20,4%), Micoplasma hominis - v 4 (5,4%). V tem primeru se bolnik ni pritoževal, ni bilo kliničnih znakov okužbe. Gardnerella vaginalis so našli pri 3 (4,2%) nosečnicah..
V prvi fazi pregleda bolnikov je bila opravljena primerjalna analiza pogostnosti odkrivanja neposrednih označevalcev HSV (infekcijska aktivnost virusa in HSV DNA). Nobena od teh žensk ni imela kliničnih manifestacij genitalnega herpesa med pregledom. Pacient je bil ocenjen kot okužen, če je bil virusni marker odkrit v vsaj enem od študiranih kliničnih materialov. V celotnem preiskovalnem obdobju je 18 (24,3%) nosečnic imelo HSV označevalce. Istočasno je bila HSV DNA odkrita pri 15 (20,3%) nosečnicah, infekcijski virus - pri 3 (4%) ženskah (slika 1). Razlike v pogostnosti odkrivanja HSV DNA v primerjavi z infekcijskim aktivnim virusom so bile statistično značilne (str<0,05).
Določili smo pogostnost odkrivanja HSV v različnih kliničnih materialih. Za prisotnost neposrednih označevalcev HSV smo pregledali 525 bioloških materialov nosečnic: 175 vzorcev krvi, vzorcev urina in urogenitalnega strganja. Pri analizi vseh raziskanih vzorcev smo uporabili vse uporabljene metode (BKM, PCR in PCR-rt) najpogosteje markerje HSV v urogenitalnem strganju (27/175, 15,4%) in vzorcih urina (20/175, 11,4%). , precej manj - v krvi (4/175, 2,3%, str<0,05).
Poleg splošne ocene je bila opravljena tudi primerjalna analiza pogostnosti zaznavanja HSV markerjev, odvisno od metode. HSV DNA smo odkrili s PCR v 16/525 (3%) vzorcih in PCR-rt v 30/525 (5,7%) vzorcih. Statistična analiza je pokazala, da je metoda PCR-rt zaznala virusno DNA bistveno pogosteje kot klasična metoda PCR (str<0,05). Инфекционно-активный вирус в биологических материалах (БКМ) обнаруживался значительно реже, чем ДНК ВПГ - в 5/525 (1%) пробах. Таким образом, чувствительность обнаружения ВПГ методом ПЦР-rt превышала чувствительность двух других использованных методов.
Majhna incidenca HSV v kliničnih vzorcih je mogoče pojasniti bodisi z odsotnostjo infekcioznega aktivnega virusa v teh vzorcih v prisotnosti virusne DNA ali z nižjo občutljivostjo metode CTB v primerjavi s PCR..
Študije so pokazale, da je količina DNA, ki jo najdemo v sečilih in urogenitalnih ostankih, višja od količine DNA v vzorcih krvi. Pri statistični obdelavi vrednosti pragovnega cikla (Ct) so bile statistično pomembne (str<0,05).
Študija krvnega seruma je pokazala, da je 64/74 (86,5%) nosečnic imelo protitelesa proti HSV-IgG med začetnim pregledom. Anti-HSV-IgG protitelesa so bila odsotna pri 10 (13,5%) ženskah. Pri 2 (2,7%) nosečnicah so ob začetnem pregledu poleg IgG-AT odkrili protitelesa IgM razreda, ki so označevalci akutne faze okužbe..
Pri ocenjevanju avidnosti IgG-AT je bilo ugotovljeno, da so pri vseh 64 (86,5%) ženskah, ki so imele IgG-AT proti HSV, ugotovili, da imajo protitelesa visoko prisotnost (IA> 50)..
Nosečnice so pregledali v dinamiki v treh fazah nosečnosti: v drugem in tretjem trimesečju in pred porodom. Med prvim pregledom v drugem trimesečju nosečnosti so 12 (14,8%) žensk z oznakami HSV in / ali PCR odkrili markerje HSV in / ali PCR. Pri 8 (12,2%) nosečnicah smo odkrili HSV markerje z odkrivanjem zelo avidnega IgG-AT (IA> 50) z visokimi titri (1: 320). Od preiskovanih nosečnic IgG-AT ni bila odkrita v dveh primerih, kar kaže na primarno okužbo..
Sprememba koncentracije IgG-AT ali odkrivanje AT z visokimi titri v krvnem serumu študije v dinamiki je spremljala identifikacija neposrednih označevalcev HSV med celotnim pregledom pri treh nosečnicah. Ena noseča IgG-AT ni bila nikoli odkrita kljub identifikaciji HSV markerjev v celotni študiji..
Pri 2 (3%) ženskah so bili med začetnim pregledom v kombinaciji z IgM-AT odkriti neposredni označevalci HSV. Pri eni od teh žensk se je nosečnost končala s spontanim splavom v drugem trimesečju..
V tretjem trimesečju nosečnosti so bili prvič ugotovljeni HSV markerji pri 3 od 74 nosečnic. Serološki pregled je pokazal, da ena ženska nima protiteles proti HSV. Po nadaljnjem pregledu te noseče ženske se pojavi nizkocenovni (IA)<50) IgG-АТ с низкими титрами 1:20. Это указывало на первичное инфицирование. У 2-х пациенток произошла реактивация инфекции, при этом у одной были выявлены высокоавидные IgG-АТ с высокими титрами 1:320, у другой титр антител составил 1:20.
Zadnja raziskava žensk pred porodom je pokazala, da so bili HSV markerji prvič odkriti pri treh nosečnicah, kljub prisotnosti protiteles proti HSV, kar kaže, da je bila okužba s herpesom ponovno aktivirana..
V štirih (5,4%) nosečnicah so bile HSV označevalci odkriti skozi celoten pregled. Pri analizi virusne obremenitve v kliničnih vzorcih je bilo ugotovljeno, da se je virusna obremenitev v dveh nosečnicah sčasoma povečala s povečanjem gestacijskega obdobja: od 100 kopdNa / ml med začetnim pregledom do 10.000 kopdNa / ml v zadnjem preiskovalnem obdobju. Dve drugi spremembi virusne obremenitve nista bili zabeleženi..
Tako je glede na pridobljene rezultate od drugega trimesečja nosečnosti 15 (20,3%) od 74 nosečnic reagiralo z virusno infekcijo. Primarno okužbo smo diagnosticirali pri 3 (4,0%) nosečnicah, 2 (2,7%) pa v drugem trimesečju nosečnosti in 1 (1,3%) v tretjem. 49 (66,2%) nosečnic je imelo asimptomatsko prenašanje. Pri 7 (9,5%) ženskah, ki so imele diagnozo kronične okužbe s HSV, je bila okužba HSV odsotna (slika 2).
Serološka preiskava 74 nosečnic v dinamiki je pokazala, da reaktivacija herpetične okužbe ni vedno spremljana z identifikacijo visokih IgG-AT titrov ali povečanjem titrov v dinamiki. Tako so pri 3 od 15 (40%) žensk pri reaktivaciji HSV titri IgG-AT odkrili z nizkimi vrednostmi (od 1:20 do 1:80)..
Sklepi
Pogostost odkrivanja označevalcev herpesne okužbe pri nosečnicah je odvisna od uporabljenih diagnostičnih metod (virološki, molekularno-biološki, serološki) in diagnostičnih medijev (kri, urin, urogenitalne ostanke). Molekularno biološke metode (PCR, PCR-rt) imajo največjo diagnostično vrednost pri preučevanju materiala iz takšnih medijev, kot so uriniranje in urogenitalne ostanke..
Ponovna aktivacija herpesne okužbe ni vedno spremljana z identifikacijo visokih titrov IgG-AT ali s povečanjem titrov skozi čas. To kaže na nizko sposobnost imunskega sistema nosečnice, da razvije zadostno količino protiteles celo v prisotnosti neposrednih označevalcev HSV in dokazuje potrebo po imunsko-korektivnih ukrepih pri nosečnicah z visokim tveganjem za infekcijo..
Glede na materiale www.rmj.ru/
Literatura
- Makatsariya A.D., Bitsadze V.O., Akinshina S.V. Sindrom sistemskega vnetnega odziva v porodništvu. M: Med. obvestiti agencije. 2006. str 448.
- Nikonov A.P., Astsaturova O.R. Genitalni herpes in nosečnost // Ginekologija. 2002. Vol 4. 4. št. 1. P. 4-6.
- Poletaev AV, Budykina TS, Morozov S.G. et al., okužba matere kot vzroka patologije ploda in novorojenčka // Alergologija in imunologija. 2001. V. 2. No. 2. P. 110-116.
- Zinzerling A.V., Melnikova V.F. Perinatalna okužba: praktični vodnik // Praktično. praktično. St. Petersburg: Epby St. Petersburg, 2002. str.
- Anzivino E., Fioriti D., Mischitelli M. et al. Stanje epidemiologije, epidemiologije, diagnostike, preprečevanja in preprečevanja // Virol. J. 2009. Vol. 40. P. 1-11.
- Bursrein D.N. Naslednje usmerjene smernice zdravljenja // Trenutni opin. Pediatrija. 2003. Vol. 15. P. 391-397.
- Suligoi B., Cusan M., Santopadre P. et al. Specifična seroprevalenca HSV-2 med različnimi populacijami v Rimu v Italiji. Italijanski forum za upravljanje herpesa // Sex Transm. Okužite. 2000. Vol. 76. P. 213-214.